Sử dụng phương pháp loop-mediated isothermal amplification (LAMP) để phát hiện Salmonella spp. từ trứng gà
Nghiên cứu do nhóm tác giả Trần Trọng Kha và Nguyễn Thị Phương Trang thực hiện.
Ảnh minh họa
Nghiên cứu nhằm mục tiêu của nghiên cứu là đánh giá hiệu quả sử dụng kỹ thuật LAMP để phát hiện Salmonella spp. từ trứng gà. Có 8 gốc vi khuẩn Salmonella và 26 gốc vi khuẩn không phải là Salmonella được dùng để xác định độ đặc hiệu của phản ứng LAMP trong việc phát hiện Salmonella. Bộ mồi Sal4 đã được thiết kế để khuếch đại trình tự đặc hiệu trên gen invA của Salmonella và kết quả của phản ứng được phát hiện bằng chất chỉ thị hydroxyl napthol blue (HNB). Các mẫu trứng sạch sẽ được gây nhiễm với huyễn dịch Salmonella ở các nồng độ pha loãng khác nhau để xác định giới hạn phát hiện 50% (LOD50) trong thử nghiệm. Các mẫu trứng cũng được thu từ các địa điểm khác nhau trong thành phố Hồ Chí Minh, tiến hành thử nghiệm phát hiện Salmonella bằng phương pháp LAMP và phương pháp nuôi cấy truyền thống để so sánh hiệu quả giữa 2 phương pháp.
Trong tổng số 34 gốc vi khuẩn được thử nghiệm bằng LAMP thì không thấy có xuất hiện kết quả âm tính giả hoặc dương tính giả. Kết quả kiểm tra Salmonella từ các mẫu trứng gây nhiễm cho thấy giới hạn phát hiện 50% của phương pháp LAMP là dưới 2 CFU/25g mẫu. Kết quả trên cũng cho thấy độ nhạy và độ đặc hiệu cao của LAMP trong việc phát hiện Salmonella từ trứng. So sánh kết quả trên 42 mẫu trứng thu thập từ thực địa bằng LAMP và nuôi cấy truyền thống đều cho thấy 4/42 mẫu là dương tính với Salmonella.
Nghiên cứu này cho thấy phương pháp LAMP có hiệu quả cao, phù hợp trong việc phát hiện mầm bệnh Salmonella ở mẫu trứng và có nhiều ưu điểm như tiết kiệm thời gian và công lao động hơn so với phương pháp nuôi cấy truyền thống.
Tạp Chí Nông nghiệp Và Phát triển 22(3), 1-8