Nghiên cứu một số đặc điểm nông học sinh học và đa dạng di truyền các vật liệu cà chua bằng chỉ thị phân từ AND
Nghiên cứu do đồng tác giả Đoàn Xuân Cảnh – Viện Cây lương thực và Cây thực phầm và Nguyễn Hồng Minh – Trường Đại học Nông nghiệp Hà Nội thực hiện nhằm chọn tạo cà chua giống lai (F1) cho năng suất cao, chất lượng tốt và đánh giá đa dạng di duyền của giữa các giống cà chua.
Ảnh minh họa
Tác giả đã sử dụng 26 dòng cà
chua lưu giữ tại Viện Cây lương thực và Cây thực phẩm, 10 chỉ thị phân tử SSR, AND
được chiết tách từ lá non của cây con 30 ngày tuổi bằng phương pháp CTAB được
mô tả bởi Doyle (1990) có cải tiến: Mẫu lá được lấy từ cây cà chua khỏe. Cắt 1g
lá non cho vào cối sứ, thêm 800 µl dung dịch chiết tách (NaCl 1,5 M, EDTA 50
mM, Tris-HCl 100 mM, CTAB 4%, β-Mercaptothanol 5%) rồi lấy chày nghiền nhỏ mẫu
lá. Chuyển dung dịch nghiền vào ống effpendoff
vô trùng đã đánh dấu cùng giống, ủ ở nhiệt độ 60oC trong 30 phút.
Giữ mẫu ở nhiệt độ phòng 5 phút sau đó cho thêm 800 µl hỗn hợp clorofom:
isoamylacol (24:1), lắc nhẹ 10 phút sau đó mang ly tâm 13.000 vòng/phút trong
15 phút, chuyển phần dịch phía trên sang ống effpendoff mới. Thêm 800 µl
isopropanol lắc đều đem ủ 30 phút, đổ dịch lỏng thu kết tủa AND. Rửa kết tủa
bằng ethanol 70% để khô tự nhiên ở nhiệt độ phòng. Hòa tan kết tủa AND bằng 50 µl
dung dịch TE (Tris-HCl 50 mM, EDTA 1mM) rồi bảo quản ở 20oC. Kiểm tra AND bằng
điện di trên gel agaroza 10%.
Kết quả cho thấy, 26 dòng
cà chua nghiên cứu đã được phân lập theo các đặc điểm cơ bản. 4 dòng có thời
gian sinh trưởng dài (120-140 ngày), còn lại 22 dòng có thời gian sinh trưởng
115-125 ngày. 4 dòng thuộc dạng hình sinh trưởng vô hạn, còn lại 22 giống thuộc
dạng hình sinh trưởng bán hữu hạn. 18 dòng có vai quả trắng và 8 dòng có vai
quả xanh, 14 dòng quả tròn dài, 5 dòng quả tròn và 7 dòng quả tròn dẹt. Trong
số 10 chỉ thị phân tử sử dụng cho đánh giá đa dạng di truyền của 26 dòng cà
chua nghiên cứu đã thu được 5 chỉ thị
cho các alen đa hình, số alen đa hình chiếm 22% (17 trong số 77 alen thu được).
Đã phân lập 26 dòng cà chua nghiên cứu thành 5 nhóm khác nhau, trong đó có
nhiều dòng thể hiện mức độ sai khác di truyền khá cao, chúng có ý nghĩa sử dụng
trong tạo giống cà chua ưu thế lai.
Tạp chí Nông nghiệp và PTNT, số 19/2013